[VIP第1年] 指数:3
急性肺损伤模型大鼠(右)与对照组大鼠肺部照片对比5.2.2肺的湿/干重比检测：肺的湿/干重比是反应肺水肿的直接指标，也是反应肺损伤严重程度的敏感指标。在急性肺损伤发生后，大量液体渗出至肺泡和肺间质，导致肺的重量增大，而肺的干重则不受影响。处死大鼠、剪断气管后取全肺，称湿重，然后将肺置于65℃恒温箱中干燥，24h后取出称干重，计算肺湿/干重比值。图7.急性肺损伤模型大鼠(ALI)与对照组大鼠肺干湿重比随不同时间点的变化。5.2.3肺泡盥洗液（BALF）中细胞计数：小鼠取血后，开胸，分离纵膈，注射器抽取3ml生理盐水从气管插管推入肺中，每次反复灌洗3次后抽出灌洗液，肺泡灌洗液以4℃3000r/min离心15min，取上清，保存于-80度用于后续检测。避免了在人身上进行实验所带来的风险。长宁区C57小鼠疾病动物模型建模
诱发性**模型的原理是利用外源性致*因素引起细胞遗传特性异常而呈现出异常生长和高增殖活性，形成**。致*因素主要有化学性、物理性及生物性致*物，而化学性致*物(chemicalcarcinogens)**常见，已确知的多达一千余种，用于诱发实验性**的种类亦很多，如苯并萨，申基胆菌、联苯胺、亚硝胺类、黄曲霉***类。各种致痒物的致*强度、致*谱等特性相差较大，同一种致*物经不同途径给药所致**部位或类型可有很大差异。有些化学性致*物具有明显的亲***或组织特性。因此，实验工作中应根据需要选用适当致*物和致*途径，并确定其他影响因素或实验条件。基本原理:利用外源性致*物引起细胞遗传特性改变，从而出现异常生长和高增殖活性细胞形成**。外源性致*物主要有化学性、物理性(如放射性物质)及生物性(如诱发动物**的病毒),其中以化学性致*物**为常用浦东新区心血管疾病疾病动物模型建模通过小鼠疾病模型的构建有助于我们深入揭示潜在致病基因作用机制。
2mg组、4mg组、6mg组lh水平均上升，同样，只有2mg组有明显升高(p＜)，如图3所示。表3表4②体重变化：(mean±sd)，如图4所示：2mg组(连续注射7天)与空白组相比，大鼠体重***下降(p＜，注射第2天开始)。3mg组(连续注射7天)与空白组相比，大鼠体重***下降(p＜，注射第4天开始)，直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg组(第1、8天注射)与空白组相比，大鼠体重分别在***次及第二次注射后的有***下降(p＜)，4mg组体重在停止给药后4天与空白组无差异。③卵巢重量：如表5、图5所示，2mg、6mg组大鼠在经过顺铂注射后卵巢重量相比对照组，都有不同程度缩减，其中2mg组卵巢重量明显减轻(p＜)，4mg、6mg组无明显差异。表5④动情周期观察(阴道涂片)：3mg组动物死亡时间早，无完整的动情周期。如表、图6所示。正常大鼠动情周期4-5天。分为四个阶段，动情前期：撇圆形有核上皮细胞占绝大多数，白细胞和角化上皮细胞很少(图a)。动情期：角化上皮细胞占多大多数，由散在增至集白细胞和有核上皮细胞很少(图b)。动情后期：片状角化上皮细胞，有核上皮细胞和白细胞3种都有，无太大差异(图c)。动情间期：白细胞占绝大多数，有核上皮细胞和角化上皮细胞很少(图d)。表6⑤病理结果：如图7所示
动物模型名称：FSH联合HCG致超排怀孕小鼠模型2、实验动物种属：KM小鼠或NIH小鼠3、实验动物性别：雌性4、实验动物年龄：3~4周龄5、实验动物体重：16~18g6、实验动物环境：SPF级1、实验方法：注射用重组人促卵泡***（FSH）联合注射绒促性素（HCG）诱导。对雌鼠于按5IU/只腹腔注射50IU/mL的FSH溶液，注射46~48h后按5IU/只再腹腔注射50IU/mL的HCG溶液，并于注射HCG当天下午约16：00~17：00按雌雄鼠1：1合笼。次日早上检查雌鼠阴栓情况。2、检测标准：合笼后次日雌鼠检查出现阴栓，表明成功构建了超排怀孕小鼠模型。小鼠是人类疾病理想的动物模型不仅因为小鼠在生理上与人类极为相似而且小鼠的遗传资源非常丰富。
2mg组、4mg组、6mg组lh水平均上升，同样，只有2mg组有明显升高(p＜)，如图3所示。表3表4②体重变化：(mean±sd)，如图4所示：2mg组(连续注射7天)与空白组相比，大鼠体重***下降(p＜，注射第2天开始)。3mg组(连续注射7天)与空白组相比，大鼠体重***下降(p＜，注射第4天开始)，直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg组(第1、8天注射)与空白组相比，大鼠体重分别在***次及第二次注射后的有***下降(p＜)，4mg组体重在停止给药后4天与空白组无差异。③卵巢重量：如表5、图5所示，2mg、6mg组大鼠在经过顺铂注射后卵巢重量相比对照组，都有不同程度缩减，其中2mg组卵巢重量明显减轻(p＜)，4mg、6mg组无明显差异。表5④动情周期观察(阴道涂片)：3mg组动物死亡时间早，无完整的动情周期。如表、图6所示。正常大鼠动情周期4-5天。分为四个阶段，动情前期：撇圆形有核上皮细胞占绝大多数，白细胞和角化上皮细胞很少(图a)。动情期：角化上皮细胞占多大多数，由散在增至集白细胞和有核上皮细胞很少(图b)。动情后期：片状角化上皮细胞，有核上皮细胞和白细胞3种都有，无太大差异(图c)。动情间期：白细胞占绝大多数，有核上皮细胞和角化上皮细胞很少(图d)。表6⑤病理结果：如图7所示。大量的遗传变异可作为研究人类疾病的借鉴。杨浦区小鼠疾病动物模型建模
可以简化实验操作和样品收集。长宁区C57小鼠疾病动物模型建模
r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步骤4、鉴定为pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周龄、雌性小鼠6周龄分别与野生型异性小鼠交配获得f1代杂合子小鼠，图2为本发明f1代杂合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程图，小鼠出生后20天进行pcr鉴定，若有阳性小鼠出生，则表示转基因已经整合到生殖细胞。(1)通过pcr方法对获得的f1代小鼠进行基因型的鉴定：(a)dna的提取：方法1：采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()来获得高纯度的基因组dna。步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2～5mm)，放入离心管中，加入180μlbuffergl，20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步骤b.将步骤a离心管内于56℃孵育过夜。步骤c.过夜后12000rpm离心2min去除杂质。步骤d.加入200μlbuffergb和200μl无水乙醇，充分混匀。步骤e.将吸附柱放在收集管上，将步骤d得到的样品加到吸附柱里，12000rpm离心2min，弃掉收集管中液体。步骤f.弃去液体后在吸附柱中加入500μlbufferwa，12000rpm离心1min，弃掉收集管中液体。步骤g.在收集管中加入700μlbufferwb，12000rpm离心1min。弃掉收集管中液体。注意：bufferwb需要与100％乙醇预混，沿管壁加入bufferwb冲走残余的盐。步骤h.重复步骤g一次。长宁区C57小鼠疾病动物模型建模
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